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外泌体是由细胞分泌的纳米级膜性小囊泡,直径约30~150nm。外泌体来源多样,广泛存在并分布于各种生物液体中,富含来源细胞的蛋白质、脂质和核酸,参与细胞间的信息交流。不同病理和生理条件下,外泌体的内容物不尽相同,因此外泌体可以很好地反映生物体的疾病与健康状态。此外,外泌体电镜,外泌体特殊的膜结构能够保护其内容物如RNA(microRNA、mRNA、lncRNA、circRNA)免受酶的降解,保证其能在各类体液中被稳定检测到,因此外泌体是研究各种疾病的良好生物学材料,外泌体电镜测试服务,可作为肿1瘤潜在的biomarker和治1疗靶点,亦可作为基因/药1物的递送载体,在疾病的诊断和治1疗方面具有广阔的应用前景。
如果癌细胞来源的外泌体进入单核细胞,通过外泌体内所含的TGF-β或前1列腺素E2等的作用,外泌体电镜检测,单核细胞会被诱导分化为髓源性免1疫抑制细胞。髓源性免1疫抑制细胞释放出IL-10等各种免1疫抑制分子,抑制免1疫细胞活化或抑制T细胞的诱导,从而抑制抗肿1瘤免1疫。癌细胞通过利用抑制免1疫细胞攻击自身这一机制,进而促进癌1症的发展。
iTRAQ (isobarictags for relative and absolute quantitation,同位素标记相对和绝1对定量)是由AB SCIEX公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝1对定量技术。该技术使用8种(或4种)不同的同位素试剂来同时标记和比较8种(或4种)不同的蛋白质样品。这些试剂由3个不同的化学标签组成:报告部分,外泌体电镜服务,肽反应部分和平衡部分。报告部分为客户可按需选择标记个数,肽反应基团将iTRAQ标签与肽段的N-端基团和每个赖氨酸侧链相连,可标记所有酶解肽段,平衡部位可保证iTRAQ试剂标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比,因此改变任一iTRAQ试剂,不同同位素在标记同一多肽后在一级质谱检测,分子量都完全相同。而在串联质谱中,同重元素标记肽段平衡基团在二级质谱发生中性丢失。信号离子表现为不同质荷比的峰,因此,根据波峰的高度及面积,可以得到蛋白质的定量信息。
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