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武汉科锐诺生物科技有限公司

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武汉科锐诺生物科技有限公司
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植物组织RNA原位杂交技术服务-科锐诺

询盘留言|投诉|申领|删除 产品编号:585178767                    更新时间:2024-09-24
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  • 主营业务:外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务
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20世纪80年代的DNA原位杂交开启了分子病理检测的大门,随后相继出现了在组织切片上的原位杂交,目的是检测肝1炎和肝1癌组织中的乙1肝1病毒。之后,越来越多的肿1瘤相关基因被发现,一批用于检测靶向治1疗药1物靶点的分子病理技术迅速问世,如FISH检测乳1腺癌HER2基因扩增、ARMS法检测肺1癌1基因突变等。

既要充分保留被测核酸,(特别是RNA)不被降解,又要尽可能维持原有组织或细胞的形态结构。

步骤:基本与免1疫组织化学技术相似,即组织要求新鲜和迅速投入固定液。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,植物组织RNA原位杂交技术服务,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。取材过程中避免手指、唾液和未经RNA酶抑制处理的器具接触标本。冷冻切片以厚5~30um佳,40℃烤箱内干燥2小时后储存在-80℃超低温冰箱,在-20℃可保存2~3周,在-70℃可保存数月之久。

PCR技术是一种在生物体细胞外通过酶促合成特异DNA或DNA片段的方法。其原理是设计特异引物,在TaqDNA聚合酶催化作用下,经过高温变性、低温退火和适温延伸3个步骤反复循环,对某一特定模板的特定区域进行扩增,反应结束后应用凝胶电泳或测序等方法分析产物。因此,该技术可以直接检测疾病组织、细胞中是否存在某种病毒DNA,同时PCR技术还是基因突变检测的前期必备技术。

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