武汉科锐诺生物(多图)-胞外囊泡电镜检测

外泌体的组成：外泌体主要含有融合蛋白和转运蛋白、热休1克蛋白(HSP 70)、CD类蛋白以及磷脂酶和其他脂质相关蛋白，但是不同来源的外泌体的组成有差异。

外泌体的提取方式：

1、离心法：此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足。

2、过滤离心：这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性，但同样纯度不足。

3、密度梯度离心法：用此种方法分离到的外泌体纯度较高，但是前期准备工作繁杂

4、免1疫磁珠法：这种方法可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单，但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。

5、色谱法：此种方法分离出的外泌体大小均一，但设备特殊，应用不广泛。

在透射电镜基础上，用外泌体标记蛋白对外泌体进行免1疫标记，利用胶体金标记出外泌体表面的特定抗原的位置。结合透射电镜形态学定性的特点，同时确定外泌体标记蛋白的位置。这样同时从形态学及免1疫学原理上验证外泌体。这样数据结果中既可以获得经典形态的外泌体，又可以定性及定位外泌体表面的标志蛋白。这样具有更充分的说服力。

外泌体研究开展的如火如荼。不论是 SCI 文章的发表还是各类基1金的申请，外泌体相关研究表现都非常亮眼。外泌体提取后，研究人员面临的一个重要问题就是，胞外囊泡电镜检测，我提取的是不是外泌体？如果是的话，质量如何？

现阶段，对外泌体进行鉴定主要有三种主流的方法：电镜、粒径和 Western blot 分析靶标物。之前我们已经对外泌体电镜进行了总结，今天我们来看看外泌体的粒径分析。

外泌体粒径分析原理

外泌体粒径分析方法为纳米颗粒跟踪分析（Nanoparticle tracking Analysis， NT A)，其原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析，结合 Stockes-Einstein 方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NT A技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一。相较于其他表征方式，NT A技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。

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