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外泌体分离提取方案。主要方案包括:
1、差速超1速离心法;
适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品;
2、基于PEG沉淀原理的试剂盒法;
适用于血1清、脑脊液等小体积的样品;
3、超滤提取法;
适用于细菌培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法,外泌体,做进一步的提取。
外泌体是细胞外囊泡的一种,其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似,电镜下,显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中,通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括:透射电镜(形态鉴定)、NTA检测(粒径及浓度鉴定)、WB(分子标志物)。NTA检测作为外泌体鉴定的经典方法之一,可同时反映出检测样品的浓度及粒径。质量较好,外泌体检测服务,纯度较高的外泌体样品,粒径分布在30-150nm,原液浓度在10^9左右。为了保证检测质量,对每一个样品,都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日,可当天到样当天出结果。
外泌体的作用
直接作用:外泌体表面的蛋白分子或脂质配体直接激1活靶1细胞表面的受体,产生信号复合体并激1活胞内信号通路。递送作用:外泌体可以与靶1细胞的质膜融合或内吞直接进入细胞,将自身携带的蛋白质、核酸、脂质等活性分子带到细胞内,进而调控细胞的功能及生物学行为。武汉科锐诺生物科技有限公司 专1业的技术 良好的服务 欢迎来电咨询!
外泌体(Exosome)是活1细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的膜性囊泡,存在于体液中,包括血液、唾液、尿液羊水等多种体液中,外泌体检测,并携带有母细胞的多种蛋白质、脂类、RNA等重要信息,能作为信号分子传递给其他细胞从而改变其他细胞的功能,是细胞和细胞间信息传递的重要方式。
体液中外泌体 RNA(特别是 miRNA 等非编码 RNA)在健康与癌1症中存在明显 的表达差异。因此外泌体里的 miRNA 常常成为某些疾病的 biomarker。
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