染色体原位杂交技术服务-武汉科锐诺生物

滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗。

.滴加生物素化鼠抗地1高辛：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。

滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。

滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。

DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。

.苏1木素复染，充分水洗。

酒精脱水，二甲1苯透明，封片。

原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精1确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。

原位杂交的特点是杂交在显微镜载玻片上中期染色体标本上进行。所谓原位即指标本上DNA原位变性，在利用放1射性或非放1射性标记的已知核酸探针杂交后，通过放1射自显影或非放1射性检测体系来检测染色体上特异DNA或RNA顺序，可用放1射性颗粒在某条染色体的区带出现的频率或荧光的强弱来确定探针的位置，染色体原位杂交技术服务，从而进行准确的基因定位。

适用场景

1、高灵敏度地检测蛋白-蛋白的交互作用；

2、寻找在蛋白-蛋白交互作用中起关键作用的结构域或活性位点；

3、寻找与靶蛋白相互作用的新蛋白；

4、寻找具有药1物治1疗作用的小分子多肽；

5、寻找调控蛋白质相互作用的化合物；

6、绘制蛋白质相互作用图谱。

酵母双杂交技术的优点

1、无需纯化蛋白；

2、检测在活1细胞内进行，可以在一定程度上代表体内的真实情况；

3、检测的结果是基因表达产物的积累效应，因而可检测存在于蛋白质之间的微弱的或暂时的相互作用；

4、酵母双杂交系统可采用不同组织、器1官、细胞类型和分化时期材料构建cDNA文库，并能分析细胞质、细胞核等多种亚细胞部位的蛋白。